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    制備液相色譜時,配制流動相的用水要求

    發布時間:2022-03-23   點擊次數:137次
      制備液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用。
     
      一般柱長在2—250mm,柱越長,分離度越高,但柱壓更高,分離所需時間更長;但分離度與理論塔板數的平方根成正比,所以一昧增加柱長并不是zui有效的分離手段,一般情況下,150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數。
     
      正相色譜n流動相極性小于固定相極性的分配色譜法稱為正相分配色譜。常用的分析柱有:n氨基柱、氰基柱、硅膠柱。n常用流動相為極性小的有機溶劑。反相色譜n流動相極性大于固定相極性的分配色譜法稱為反相分配色譜法。常用的分析柱有:ODS(C18),C8,C2。n常用流動相為甲醇-水,乙腈-水。
     
      空間排斥色譜n也稱凝膠色譜,依據被分離組分分子尺寸與凝膠空徑大小之間的相對關系而分離,類似于分子篩作用。在一定分子線團尺寸內,分子越大,保留時間越短。凝膠滲透——以有機溶劑為流動相凝膠過濾——以水溶液為流動相對于相同化學組成的高分子化合物,其分子尺寸大小與分子量成正比,因此凝膠色譜可以研究高分子化合物的分子量分布。
     
      制備液相色譜時,配制流動相應用新鮮水,水質要求越高放置時間越短。理想的HPLC用水應為0.055μS/cm的超純水,并通過0.22μm的濾膜,除去熱源、有機物、無機離子及空氣等。
    蘇州匯通色譜分離純化有限公司

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