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          制備液相色譜中,某個狀態出現異??梢赃@樣子排除

          發布時間:2022-03-07   點擊次數:97次
            對制備液相色譜中的一些常用概念做一下介紹。
           ?。?)分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質。為了加快分離的時間與提高分離的效率,制備色譜的的進樣品量很大,導致制備色譜柱子的分離負荷的相應加大,也就必須加大色譜柱填料,增大制備色譜的直徑和長度,使用的相對多的流動相。
           ?。?)樣品的前處理:
           ?。?)制備色譜柱的材質及其特點
           ?。?)固定相的選擇:
           ?。?)裝柱方法的選擇根據固定相顆粒度和柱子的尺寸,采用不同的裝柱方法,往往裝填越好分離效果越好。
            制備液相色譜中,有三個可以觀察到的狀態:柱壓、檢測器基線、譜圖。通過觀察和記錄這三個狀態可以監測儀器是否正常。若某個狀態出現異常,故障排查和解決方案如下。
            1、柱壓波動
            1)吸液管路進氣泡①溶劑不足,吸濾頭吸入空氣,添加溶劑并排氣泡。②吸濾頭臟了或堵塞,用異丙醇(或5%稀硝酸)清洗。③溶劑中有氣泡(尤其兩種以上溶劑混合),超聲(或抽濾)脫氣。
            2)泵流量不穩①單向閥堵塞,大流速,若不能解決,則需拆下單向閥(異丙醇)超聲清洗清洗或更換單向閥。②柱塞密封圈磨損,更換密封圈。③泵頭污染,柱塞桿往復活動受阻,清洗泵頭。
            3)柱床塌陷,維修或更換色譜柱。
            4)流動相混合后吸放熱導致溫度變化,以致柱壓波動,如乙腈和水混合吸熱,甲醇和水混合放熱。若影響實驗結果,則增加柱溫箱或流動相預混。
            2、柱壓升高或超壓。逐段排查堵塞的位置:
            1)先拆下色譜柱,接上兩通運行,若是色譜柱堵塞:①進樣后樣品析出,用合適的溶劑反沖色譜柱。②緩沖鹽析出,用大比例水相的流動相沖洗色譜柱。③機械雜質堵塞篩板,異丙醇小流速反沖色譜柱。④色譜柱污染嚴重,需維修或充填。
            2)混合器堵塞,維修或更換。
            3)六通閥堵塞,將泵液管路接到連接色譜柱的閥口處,將閥扳至load狀態,用易溶樣品的溶劑小流速沖洗。4)壓力傳感器故障,維修或更換。
            3、檢測器基線波動
            1)基線有規律波動,且幅度較大,則可能有氣泡持續進入流通池。排查氣泡來源并用異丙醇沖洗檢測器或色譜柱。
            2)基線小幅度規律波動,可能是檢測器燈能量不足(能量下降后,低波長下靈敏度先下降。
            3)基線漂移。①流動相在此檢測波長下有吸收。更換流動相或改變波長。②色譜柱或檢測池污染。以異丙醇沖洗色譜柱或檢測池,或將檢測池中透鏡玻片取出清洗。
            4、譜圖重現性差1)檢查方法設置,包括流速、梯度、波長。
            2)檢查流動相配置是否有誤,A、B兩相是否放反。
            3)檢查柱壓與之前是否有差異,若有變化,則前面1和2進行排查。
            4)進樣前色譜柱是否完全平衡好。
            5)樣品溶解方法。
          蘇州匯通色譜分離純化有限公司

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